更新时间:2026-07-10
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一、技木详细介绍
IP(免疫系统性沉淀出的出的,Immunoprecipitation)和Co-IP(免疫系统性共沉淀出的出的,Co-Immunoprecipitation)是设计血清质功能性及充分帮助的管理的本质技能,具有广泛性适用于分子式动物学和人体细胞动物学方向。
二、技术性原则
IP用非特异朋友抵抗能力与总体目标蛋清组合,应用抗体阳性将靶标淀粉酶(即抗原)提取出来了,所以判断某段种淀粉酶的描述环境;而CO-IP是在IP基础框架上,查证蛋清质间的互为的作用。借助捉捕一些蛋清(耳料蛋清),的检测两者结合实际的互作蛋清(靶蛋清),于是特女性朋友生物富集所科研的目标蛋白质,从根本上探究包覆物中与给定球蛋白酶出现之间用处的球蛋白酶。

三、运用环境
1.IP:含有低丰度蛋白酶于质谱亲子鉴定(IP-MS)、认可表面抗原特喜欢的人。
2.Co-IP:深入分析转录细胞混合物、激酶-底物相互之间影响及印证求该互作或出现新互作伙伴们(如手机信号通道混合物)。
四、技术设备好处
1.IP:拥有高特女性朋友,依耐抗原-抗原的爱情专一性综合。
2.方便性:苹果支持物可选装磁珠(作业方便、电脑自动化设备兼容)或琼脂糖(高依照出水量)。
3.Co-IP:体内真实性:研究的是体内自然状态下的蛋白质互作,可反应比较真实的蛋白互作。
五、样本量方式
刚采神经元(贴壁神经元/漂浮神经元)、冻存神经元、冻存团体、裂解液子样本。
六、样表各种需求
组织细胞系样本量:约5×10^6个(都可以是5个6cm皿,或以悬停组织细胞系状态存放于离心分离管上,或5个T25瓶);
冻存安排:约40mg;裂解液样例:核蛋白酶酸度不高于2mg/mg,核蛋白酶需求量不高于3mg。
七、模本开始准备&货运
活受损神经细胞系模板量:空距较近的可可以提供新鮮模板量,将培养教育在皿/T25瓶/离心分离管道内的新鮮受损神经细胞系模板量常温状态快递包裹(最迟第二日达)货物运输物流,天津市内可闪送或亲自递送,空距过远的,可-80℃冻存受损神经细胞系干冰货物运输物流;
组建范本&裂解液范本:-80℃冻存干冰公路运输。
八、需提拱的化学药品
查重用IB抗原和IP抗原
九、实验英文时期
1-2周(不富含质谱)
十、别的
未果的检测Western blot/球蛋白谱
